全自动超高速固定脱水浸透装置(Histra-QS)考评报告

在常规外检病理工作中,对标本采用传统的组织固定和脱水方法通常需要1-2天的时间才能完成标本处理,然后进行包埋、切片和染色。因此常规病理报告至少需要2-3天才能出结果,这对于为了加快床位周转,急于想知道最后诊断的临床医生,术后焦虑不安的患者来说等待时间太长,对外地患者来讲过多的等待必然使医疗费用增加。目前,市场上推出了一种新的全自动高速固定脱水浸透装置,能解决上述问题。近期我们对日本生产的全自动超高速脱水装置(Histra-QS)进行全面考评,并与传统的组织固定、脱水处理系统进行比较,评估其实用价值及可行性。

 

1   材料和方法

1.1  组织来源、大小及固定情况

考评标本直接取之日常各种病理标本共70份,其中小标本53个,大标本17个,分别取自乳腺、甲状腺、肾上腺、阑尾、肝脏、胃、小肠、结肠、肾脏、肺、脾脏、胆囊、食道、子宫、胰腺、睾丸、卵巢及皮肤等脏器或组织。小标本横截面积分别不超过3mm²、3~5 mm²,厚度不超过3mm;大标本长、宽不超过20mm,厚度不超过3mm。有小标本5份以纱布包裹。固定情况:有正常固定的,时间为12小时以上;较短时间固定,小于两小时及未固定的新鲜标本。

1.2 处理方法

评1 —评40 为小标本,机器常规脱水程序,脱水时间为58分钟;

评41—评50 为小标本,(其中47-50号标本为新鲜标本),机器常规脱水程序,脱水时间为58分钟;

评51—评60 为大标本,机器常规脱水程序,脱水时间为140分钟

评61—评70 为大标本,固定<2小时较新鲜标本,机器常规脱水程序,脱水时间为140分钟。

1.3 染色种类

70例全部采用HE染色。选择其中5份标本进行了特殊染色(PAS、镀银、Masson三色)、5份标本进行免疫组化检测,选择4个抗体:AE1/AE3(细胞角蛋白)、Vimetin(波形蛋白)、CD34(内皮细胞)及LCA(白细胞共同抗原)。特殊染色与免疫组化同时选择传统方法处理的蜡块一起切片、染色作为对照,避免批间差。

 

结果

2.1 固定脱水浸透时间的比较

  常规固定脱水浸透需16~20小时;超高速固定脱水浸透:小标本约需60分钟,大标本约需140分钟。

2.2 处理完成后组织性质的比较

超高速固定脱水组织与常规固定脱水方法处理的组织在性质上没有明显区别,个别组织出现的皱缩现象为外界人为因素造成。

2.3 试剂用量的比较

  常规固定脱水机有16步程序,每罐试剂容量为约5000ml;超高速固定脱水机仅9步程序,每罐实际用量约700ml。试剂用量明显节约。

2.4 常规HE染色比较

横截面积不超过3mm²的小标本染色清晰,胞质和细胞核染色对比度好,与传统方法处理的组织染色结果无差异。(见图1、图2)

 

1 高速脱水的小标本:胃粘膜,HE×40

 

 

2 常规脱水的小标本:胃粘膜,HE×40

 

3-5mm²的标本运行小标本程序后组织染色稍不清晰,延长时间后得到改善,与传统方法无差异。

大标本运行大标本程序后制片质量良好,偶尔较致密的组织如子宫肌瘤等清晰度稍逊于传统切片,但不影响阅片及病理诊断(见图3、图4)。

图3 高速脱水的大标本:肾脏,HE×40

 

图4 常规脱水的大标本:肾脏,HE×40

 

未固定的新鲜标本,组织脆性较高,切片后的组织易碎裂和产生刀痕,制片不如传统切片平整。

2.5 特殊染色

小标本、大标本的特殊染色与传统处理的组织无差异,阳性结果可信。(见图5~图8)

图5 高速脱水组织:胃粘膜,PAS×100

 

 

图6 常规脱水对照:胃粘膜,PAS×100

 

 

图7 高速脱水组织:胃粘膜,嗜银染色×100

 

 

图8 常规脱水对照:胃粘膜,嗜银染色×100 

2.6 免疫组织化学染色

选择的4种抗体分别表达上皮组织、间叶组织、血管及淋巴造血细胞。切片组织结构清楚,对比明显,阳性表达定位准确,与传统处理的组织无区别。(见图9~图12)

 

图9 高速脱水组织:胃粘膜,AE1/AE3×100

 

 

图10 常规脱水对照:胃粘膜,AE1/AE3×100

 

图11 高速脱水组织:胃粘膜,CD34×100

 

图12 常规脱水对照:胃粘膜,CD34×100

 

讨论

由于在组织处理过程中加入了超声波能,因此全自动超高速固定脱水浸透装置能在很短时间内处理组织。但超声波对不同大小、不同密度组织穿透能力不同,因此所需处理时间也稍有差异。我们所观察到的制片略模糊和染色不均可能是因脱蜡不完全导致。改进方法后证实,如果严格控制组织大小,并运行相应组织处理程序,能完全达到常规方法处理组织的效果,甚至更好。

对于密度较高的组织,如肌组织、肾脏、乳腺实质、胰腺等建议比使用说明中推荐的处理时间略微延长或组织取材略缩小以达到良好的制片效果。

本装置已说明(采集标本必须放在固定液中保存)新鲜组织不易直接进入脱水程序,本次考评试验也证明了新鲜组织因脱水不完全组织易碎裂、皱褶,增大切片难度。为保证切片质量,我们建议在条件允许的情况下,组织先进行正常固定。

试剂使用情况:按照实际使用情况,常规试剂Tank1—Tank9使用次数可以增加至15次左右,清洗试剂:Tank10—Tank12使用次数应<10次,尤其Tank9建议在使用5次后调换,这样可以延长其他试剂的使用次数,以及机器使用寿命。

超高速固定脱水系统对于标本大小要求较高。我们认为评估测试的脱水程序所对应的标本需区分大小标本,才能用同一时间的程序处理,达到满意的制片效果。但从实际临床送检标本来看很难达到标本大小的完全一致,因此建议脱水程序设置应以大不以小,这样脱水效果不受影响,能够同时处理大小不一的标本。

病理实际工作中,常有1~2mm³的小标本,需用纱布包裹以防漏失,我们对5份小标本用纱布包裹进行试验,其切片质量不受影响。

通过多次样品的实践,全自动超高速固定脱水浸透装置的优点是显著的,主要有以下几点:

1. 相较常规固定脱水机,时间大为缩短;

2. 试剂用量少,并可使用常规试剂,节约成本显著;

3. 该装置体积小,占用空间少;

4. 组织脱水效果和常规脱水相比并无明显区别,切片质量有保证,完全符合病理诊断的要求。

该装置存在的不足之处,我们体会有以下几点:

1. 一次性处理标本数量比较有限(最多20个),不适合大批量标本操作需求;

2. 操作界面语言最好能换成中文;

 

结论

我们的考评实验证实,使用全自动超高速固定脱水浸透装置能做到当天出片、当天出病理报告的要求,切片质量有保证,不会影响诊断的准确性,达到了病理快速诊断的目的。我们体会,该装置可作为病理科常规工作的一个补充,为临床上需要尽快知道病理诊断结果的特殊患者服务。

 

 

 

上海瑞金医院病理科

2009年4月14日

更新时间

全自动超高速固定脱水浸透装置(Histra-QS)考评报告

11111

11111

来源:

点击数:

本网站由阿里云提供云计算及安全服务 Powered by CloudDream